記者 尾尻和紀 報道
マイコプラズマ（mycoplasma）とは、細胞壁を持たず、多形性が高く、人工培地で増殖できる最小の原核細胞型微生物のグループで、糸状や分枝状の形態を形成できることからマイコプラズマと呼ばれています。0.1～0.3ミクロンの大きさしかないため、0.2ミクロンの除菌フィルターを通過することができ、その汚染は通常は防ぐことができません。これは、大規模な工業生産に大きな課題を提起しています。
マイコプラズマは従来、細胞の増殖や発現に大きな影響を与えると考えられていましたが、薬剤の品質に与える影響は非常によく研究されています。最近FDAは、マサチューセッツ大学ローウェル校と共同で、CHO細胞で発現した抗体医薬の品質に対するM. argininiの効果を具体的に調べる研究を実施しました。
研究者らは、ウェーブリアクター連続灌流培養システムにおいて、異なる時間帯（D2、D3、D9）で高濃度と低濃度を添加しました。M. argininiを用いて、異なる期間におけるマイコプラズマ汚染の高低が抗体医薬の品質に及ぼす影響をシミュレート的に検討しました。
その結果、マイコプラズマ汚染のないプロセスの細胞生存性は、コントロール条件下で正常な状態を維持していたことを示しました。汚染された場合、細胞の生存率の有意な低下があり、次いで酸性ピーク含有量が最大60％以上まで有意に増加し、従来の制御限界の2倍以上に増加しました。
多量化については、マイコプラズマの混入は有意な影響を及ぼしませんでした。しかし、グリコシル化については、Ｄ２およびＤ３によるマイコプラズマの早期汚染の存在下では、Ｍａｎ６の含有量はインキュベーション時間とともに有意に20％以上までに増加しました。Man5とMan6のレベルは、D9の後期の汚染の間に一緒に有意に増加し、全体の割合は約30％に達しました。
酸性ピークや高マンノース糖タンパク質の制御が抗体治療の制御の鍵となるが、酸性ピークは通常、脱アセチル化したものや唾液酸性化したタンパク質の亜種であり、これらの含有量を３０％以下に制御することが好ましいです。高マンノース糖鎖型は、非フコース糖鎖型のグリコシドであるため、ADCC効果をある程度増強し、この効果に依存しない抗体に悪影響を与えるとともに、ある程度の免疫原性を導入し、半減期に影響を与える可能性があります。
この結果は、マイコプラズマ汚染が抗体の酸性ピークと高マンノースグリコフォームに影響を与えていることを示唆しており、マイコプラズマの制御の重要性をさらに強調しています。マイコプラズマ汚染の最大の課題は、検出が容易でないことですが、今回の研究では、マイコプラズマ汚染の高濃度・低濃度に関わらず、細胞生存率が著しく低下しており、抗体の質に影響を与えているのはマイコプラズマそのものなのか、それとも細胞生存率低下後の細胞内物質の放出が短期間で抗体構造の変化を引き起こすのかは不明であり、さらに踏み込んだ研究が必要です。