厚生労働省の情報

記者　尾尻和紀　報道

さまざまな種類のがんを持つ多くの人にとって、免疫チェックポイント阻害薬は、免疫力を高めて病気と闘うのに効果的ですが、すべての患者さんがこれらの薬の恩恵を受けられるわけではありません。

現在、マサチューセッツ総合病院（MGH）とハーバード・メディカル・スクール（HMS）の研究者が率いるチームは、どの患者が免疫チェックポイント阻害薬に反応するか、どの患者が他の戦略で治療すべきかを示す潜在的な臨床マーカーを特定するのに役立つ方法を開発マウスました。

今回の研究では、マウスに乳がん腫瘍を移植し、免疫チェックポイント阻害剤で治療する方法を開発しました。

「私たちは最初に、マウスの乳房の両側に1つずつ乳腺腫瘍を配置した切除と応答の両側腫瘍モデルを開発しました。次に、腫瘍の微小環境を評価し、もう一方の切除されていない腫瘍の反応をモニターするために、1つの腫瘍を切除しました。免疫チェックポイント遮断は、マウスを応答者か非応答者かを識別します」と、主著者のIvy X. Chen博士（MGHのEL Steele Laboratory of Tumor Biologyの元ポスドク研究員）は説明しています。

このモデルシステムを使って、研究者たちは、反応性のある腫瘍には、がんを殺す「サイトトキシン」が多く含まれていることを発見しました。

腫瘍内の細胞傷害性T細胞の遺伝子発現解析により、応答性腫瘍と非応答性腫瘍を区別するユニークな遺伝的特徴が明らかになりました。

「重要なことは、免疫療法チェックポイント阻害剤治療を受けたメラノーマ患者において、反応性腫瘍と非反応性腫瘍のこれらの遺伝的シグネチャーが、反応性と非反応性の遺伝的シグネチャーと有意に相関していることを発見したことです。」と共著者のMeromit Singer博士、Dana-Farber Cancer Instituteのデータサイエンス部門とハーバード大学医学部の免疫学部門の助教授は述べています。

この研究の意味合いは、免疫チェックポイント阻害剤に対する患者の反応を予測できる新しいマーカーの同定にとどまらないかもしれません。

「本研究は、免疫療法の潜在的な利益を理解するために、腫瘍微小環境の動的な免疫制御を調べることの重要性を強調しています。他の腫瘍タイプの免疫チェックポイント阻害剤に対する抵抗性メカニズムや反応のバイオマーカーを研究し、発見するためのアプローチを拡張したいと考えています。」と、Rakesh Jain博士、AW Cook放射線腫瘍学の教授であり、MGHのSteele Labのディレクターは述べています。

記者　尾尻和紀　報道

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セントルイスにあるワシントン大学医学部の科学者たちは、鼻から1回分の投与で、この新型コロナウイルスに感染しやすいマウスの感染を防ぐ効果のあるSARS-CoV-2ウイルスに対するワクチンを開発しました。

研究者らは次に、ヒト以外の霊長類やヒトを用いて、COVID-19の感染を防ぐためのワクチンが安全で効果的かどうかを検証する計画である。

開発中の他のCOVID-19ワクチンとは異なり、このワクチンは鼻（通常は最初の感染部位）から送達されます。今回の新しい研究では、研究者らは、鼻からの送達経路が全身に強力な免疫反応を生み出すが、特に鼻や呼吸器に効果があり、体内での感染拡大を防ぐことを明らかにしました。

上級著者のMichael S. Diamond医学博士は、「鼻や上気道の内部細胞に強い免疫反応が見られ、このウイルス感染に対する強力な防御効果を獲得したことを喜ばしく思う 」と述べています。Herbert S. Gasser医学教授は、「これらのマウスは病気から十分に保護されていました。 いくつかのマウスでは、免疫系が殺菌された証拠が見られ、マウスがウイルスに攻撃された後も感染の兆候は見られませんでした。」と言いました。

ワクチンを開発するために、研究者たちはウイルスのとげのあるタンパク質を、風邪の原因となる別のウイルス、コロナウイルスが細胞に侵入するために使用されるアデノウイルスに挿入しました。しかし、科学者たちはアデノウイルスに手を加え、病気を引き起こさないようにした。 この無害なアデノウイルスは、背骨のタンパク質を鼻の中に運び、病気になることなくSARS-CoV-2ウイルスに対する免疫防御を体に与えます。

経鼻投与以外のもう一つの技術革新は、新しいワクチンが2つの変異体を背骨タンパク質にドープすることで、それに対する抗体の形成を最も助長する特定の形状に安定化させていることです。

アデノウイルスは、ＣＯＶＩＤ-１９および他の感染症（例えば、エボラウイルスおよび結核）に対する多くの治験用ワクチンの基礎となっており、良好な安全性および有効性の記録を有しているが、これらのワクチンの経鼻送達に関する研究はほとんど行われていません。

共著者であるDavid T. Curiel放射線腫瘍学特別教授は、「COVID-19のために開発された他のすべてのアデノウイルスワクチンは、腕や太ももの筋肉に注射して送達されます。鼻は新しい経路なので、私たちの結果は驚くべきものであり、期待されています。同様に重要なのは、1回の服用でこのような強力な免疫反応が得られるという事実です。完全な保護のために2回の投与が必要なワクチンは、様々な理由で2回目の投与を受けない人がいるため、効果が薄いです。」と述べています。

鼻から送達される FluMist と呼ばれるインフルエンザ ワクチンがありますが、それは生きたインフルエンザ ウイルスの脆弱なフォームを使用しており、その免疫システムが癌、HIV、エイズなどの病気によって損なわれている人々 を含む特定の集団で使用することはできません。

対照的に、本研究の新しいCOVID-19経鼻ワクチンは、複製可能な生きたウイルスを使用していないため、より安全性が高くなる可能性があります。

記者　尾尻和紀　報道

記者　尾尻和紀　報道

ゲノム配列解析の進歩に伴い、がん治療では、がん細胞の生存に重要な標的を特定するために、がん特有の遺伝的欠陥を利用した「合成致死」という考え方を利用しようとする動きが活発化しています。

異なる遺伝子の非致死的変異が細胞内で結合して致死的になると、合成殺傷につながります。

2020年7月27日、米国科学アカデミー紀要（PNAS）のオンライン版に掲載された新しい論文の中で、Ludwig Institute for Cancer Research San Diegoとカリフォルニア大学サンディエゴ校医学部の研究者は、主要な酵素の阻害が、乳がんと卵巣がんの2つの主要なタイプに関連するヒトのがん細胞の死につながり、マウス研究では腫瘍の増殖が減少したことを報告しています。

上級研究の著者であるRichard D. Kolodner博士、医学・細胞・分子医学の特別教授、サンディエゴのルートヴィヒがん研究所のメンバーのチームは、合成致死関係を見つけるため、Saccharomyces cerevisiaeという基礎研究で使用される酵母の一種であることを研究しました。

研究チームは、DNAの複製と修復に関与するDNA構造特異的核酸エンドヌクレアーゼであるフラップエンドヌクレアーゼ1（FEN1）に着目した。彼らはがん細胞に着目し、低分子阻害剤や遺伝子アブレーションを用いてFEN1の機能を阻害すると、BRCA1とBRCA2の変異がん細胞株が優先的に死滅することを発見しました。驚くべきことに、正常細胞はFEN1の阻害から回復することができました。

BRCA1遺伝子とBRCA2遺伝子は通常、乳がんや卵巣がんなどのがんを予防する働きをしていますが、変異すると乳がんや卵巣がんになりやすくなったり、若くしてがんになりやすくなったりすることがあります。

乳がんと診断された女性の10％未満がBRCA変異を持っていますが、BRCA1変異を持つ女性の55～65％が70歳までに乳がんを発症し、BRCA2変異を持つ女性の約45％が乳がんを発症すると推定されています。

同様に、BRCA変異のある女性は卵巣がんのリスクが高く、BRCA変異のある男性は乳がんや前立腺がんのリスクが高くなります。

国立がん研究所によると、乳がんは米国で最も多いがんの一種で、毎年約２７万６００００人が新たに発症しているという。

前立腺がんは4番目に多いがんで、新規症例数は191,930件、卵巣がんは17位で、年間の新規症例数は推定21,750件となっています（国立がん研究所調べ）。その後、Kolodner氏らは、免疫不全マウスの異種移植モデルでこのアプローチを試験したところ、FEN1の阻害により腫瘍の増殖が有意に抑制されることを見出しました。

研究者らは、今回の発見は、合成致死関係を発見するための遺伝子ツールとしてSaccharomyces cerevisiaeを使用することの価値を強調していることと、FEN1阻害剤が標的とする脆弱性を持つ特定の癌を治療するためにさらに開発される可能性のある治療薬であることを明らかにしているという2つの点で意義深いものであると述べています。

記者　尾尻和紀　報道

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胃がんは世界で最も発生率の高い悪性腫瘍で、その発生率は男女を問わずあらゆる種類のがんの中で第1位を占めています。胃がんの発生率が高いアジアでは、胃がん患者の大半を日本が占めています。

1.Claudin18.2と病気との関係

Claudinタンパク質は、細胞間の緊密な結合を形成する膜貫通型タンパク質であり、主にバリア構造の透過性を調節する機能を持っています。Claudin18.2は、正常組織では分化した胃粘膜上皮細胞上にのみ発現し、原発性胃癌や転移性胃癌に多く発現する特異性の高い細胞表面分子である。

また、18.2分子の活性化は、肺がん、膵臓がん、卵巣がんでも観察されています。 高度に特異的な細胞膜発現タンパク質である18.2は、モノクローナル抗体医薬の理想的なターゲットである。

2.Claudin 18.2 抗体医薬品の開発状況

2016年、Ganymed社はASCOにおいて、クラウディン18.2の新規ファーストインクラス抗体であるZolbetuximab（IMAB362）が、化学療法剤であるEOXとの併用または非併用により、クラウディン18.2陽性の胃がんおよび胃食道接合部腺がん患者の全生存期間中央値を有意に延長したことを発表しました。

それ以来、Claudin18.2は人気のある標的となり、抗がん剤のランドスケープの重要な一部となっています。

Claudin18.2はPD1と同じくらいの意気込みで開発されているので、より良い抗体を早く手に入れるためには、第1階層に座ることが特に重要です。

3.Claudin18.2 組換えタンパク質開発の課題とその対応

タンパク質自体の観点からは、18.2は4つの膜貫通ドメイン、2つの細胞外ループ、および細胞内に位置するNH2末端とCOOH末端を有します。

PD-1やPD-L1のような従来の単一膜貫通型タンパク質は、単に細胞外ドメイン（ECD）領域を発現させて、そのコンフォメーションを維持しているだけであるが、PD-1やPD-L1は、細胞外ドメインを発現させていないため、細胞外ドメインを発現させることができません。

しかし、複数の膜貫通タンパク質の細胞外ループは独立したドメインではなく、細胞外セグメントのみを発現させると正しいコンフォメーションを維持することができず、正しいコンフォメーションを維持するためには膜貫通セグメントの結合が必要となります。

これにより、タンパク質の発現が著しく困難になる。 このため、Claudin18.2に対する抗体のほとんどは、今でも細胞株やDNA免疫に由来しているが、Claudinファミリーの他のメンバーやGPCRにも由来しています。

尾尻和紀先生はClaudin18.2膜タンパク質の機能ドメインとエピトープを示す組換えタンパク質を、構造制約と構造モデルに基づいて設計し、タンパク質の2つの細胞外ループを完全に示すようにしました。QCリリースやその他のアッセイに適しています。Claudin18.2組換え蛋白質とIMAB362の結合曲線はELISA法によりよく検証されています。

さらに、特殊な発現法により、天然の完全長Claudin18.2タンパク質、すなわち、膜貫通、細胞外、細胞内セグメントを完全に有する完全長のタンパク質を、突然変異、置換、編集なしで得ることに成功しました。完全長18.2タンパク質の生産は、抗体を得るための従来の免疫アプローチを置き換えることができます。

また、全長Claudin 18.2とIMAB362もよく結合し、より高い親和性を示すことがELISA実験で確認されています。

記者　尾尻和紀　報道

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臨床試験の結果は、F-627が先発の長時間作用型G-CSF製剤「ノイラスタ」に「非劣性」であることを証明したに過ぎないが、F-627の新しい分子構造設計と厳格な臨床試験は、今なお国内の先発新薬開発の手本となっており、国際市場に進出し、新世代の世界的な長時間作用型薬として期待されています。

しかし、Ｆ-６２７は、Ｇ-ＣＳＦ単独では第３世代を代表するものではないかもしれません。カリフォルニア州IrvineにあるSpectrum Pharmaceuticalsには、長時間作用型G-CSFであるEflapegrastimもあります。同社はすでに昨年12月にEflapegrastimのBLAを申請しており、PDUFAの日付は今年の10月24日となっています。

だから、調べれば調べるほど、一見パターンがはっきりしているように見える市場でも、豊かで変動性のあるものがあることに気づくのです。

Eflapegrastimの分子設計

Eflapegrastim（現在のプロジェクトコード SPI-2012）は、柔軟なPEGリンカーを介してG-CSFに結合したIgG4由来のFcドメインであり、FcドメインはFcRnのエンドサイトーシスを介して分子の骨髄組織内での透過性と保持時間の増加を助け、G-CSF部分はG-CSFRの下流経路を活性化するために正常に機能します。

この分子は、Spectrum Pharmaceuticals社がHanmi Pharmaceuticals社から輸入したもので、Hanmi社のLAPSCOVERY社の長時間作用型タンパク質技術プラットフォームをベースにしています。

対応する特許情報によれば、EflapegrastimのＦｃ部分とＧ-ＣＳＦ部分の両方を大腸菌発現系で発現させています。また、ＰＥＧリンカーについては、両切片の末端にシスチン変異を行いました。

Eflapegrastim分子はG-CSFを1つ含有しているのに対し、F-627は2つのG-CSFを含有しています。

このような二価設計は、理論的なメカニズムに基づいています：二価のG-CSFは、G-CSFRの活性化を高め、下流のシグナル伝達経路の活性化により、顆粒球の増殖がより強力に促進されます。いくつかの試験管内研究のデータからも、この理論が確認されています。

分子の半減期について 血清中および骨髄中の薬物濃度を測定することにより、Eflapegrastimの濃度がPegfilgrastimは作用時間の長い特性を反映して作用が遅く、f-627は半減期もペグフィルグラスチムは、長時間作用の特性を反映して、よりゆっくりとしたものになっています。また、F-627はPegfilgrastimよりも半減期が長いです。

記者　尾尻和紀　報道

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2020年7月9日、デンマークのレオ製薬は、成人の中等度から重度のアトピー性皮膚炎（湿疹）の治療薬としてIL-13モノクローナル抗体トラロキヌマブの販売承認申請が、2021年第2四半期のPDUFA期日をもってFDAに受理されたことを発表しました。

また、EMAは、現在CHMPの審査中であるトラロキヌマブのマーケティング申請を受理しています。Tralokinumabは、世界初のIL-13モノクローナル抗体として上市申請を行っており、IL-13が承認された最初の治療薬として期待されています。承認されれば、現在のゴールドスタンダードであるIL-4Rαモノクローナル抗体Dupixentを中等度から重度のアトピー性皮膚炎の治療に使用することが可能となる13のモノクローナル抗体です。

Tralokinumab社は、アトピー性皮膚炎（湿疹）などのアレルギー性疾患において重要な役割を果たすTh2経路のキードライバーの一つであるIL-13を標的とした完全ヒト型モノクローナル抗体であり、IL-13シグナル伝達経路を阻害することでアトピー性皮膚炎の治療が期待されています。

トラロキヌマブは、アトピー性皮膚炎（湿疹）などのアレルギー性疾患において重要な役割を果たすTh2経路のキードライバーの一つであるIL-13を標的とした完全ヒト型モノクローナル抗体であり、IL-13シグナル伝達経路を阻害することでアトピー性皮膚炎の治療が期待されています。

BLA申請は、「ECZTRA 1」「ECZTRA 2」「ECZTRA 3」の3つの枢要臨床試験、「ECZTRA 1」「ECZTRA 2」は52週間の単剤臨床試験、「ECZTRA 3」は32週間の外用グルココルチコイドとの併用臨床試験で、それぞれ802名、794名、380名が登録されており、安全性と有効性のデータに基づいています。

レオ ファーマ株式会社は2019年12月11日、ECZTRA 1、ECZTRA 2、ECZTRA 3の3つの第3相臨床試験がすべての主要評価項目と副次評価項目を満たし、全体的な安全性プロファイルはプラセボと同様であったと発表したが、具体的なデータは発表されませんでした。

IL-4とIL-13は、Th2経路の主要なドライバーであり、湿疹治療に重要な役割を果たしています。ただし、現在承認されているのはIL-4Rα（IL-4/IL-13）モノクローナル抗体「デュピセント」のみ、2020年6月 NMPAは5月17日、中国でのダピトール（一般名：デュプリマブ）の発売を承認しました。

上市申請中のTralokinumabに加え、別のIL-13モノクローナル抗体であるレブリキズマブも2019年10月17日に第2b相臨床データを発表しており、デュピセントと比較して全体的に非劣性であり、4週間投与の可能性があり、結膜炎のリスクが有意に低いことに加えて、結膜炎のリスクが有意に低いことを示しています。

Lebrikizumabのポテンシャルに基づき、2020年1月10日、リリーはDermiraを現金11億ドルで買収しました。

レブリキズマブは、高親和性のIL-13モノクローナル抗体で、IL-13Rα1/IL-4Rαヘテロ二量体の形成とその後のシグナル伝達を阻害し、IL-13の生物学的作用を阻害します。

IL-4Rα抗体Dupixentは、I型受容体（γC/ IL4Rα）とII型受容体（（IL13Rα1/ IL4Rα）シグナル伝達経路の両方をブロックするのとは異なり、IL-13抗体LebrikizumabはII型受容体（（IL13Rα1/ IL4Rα）シグナル伝達経路）のみをブロックし、内因性のIL-13調節はブロックしません。I型受容体（γC/IL4Rα）シグナル伝達経路の遮断が、デュピセントの特徴的な結膜炎の副作用の原因となっている可能性があります。

また、トラロキヌマブはII型受容体シグナル伝達経路のみを阻害するが、レブリキズマブよりも低い親和性と半減期で内因性のIL-13調節を阻害します。

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